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關于 大腸桿菌的傳代

日期:2024-10-27 08:24
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摘要: 疑問:我們廠在進行GMP認證,我想問一個有關微生物的問題: 從省藥檢所剛買了一只斜面大腸桿菌(Escherichia coli)菌種,如果一個月傳代一次,那么一般傳多少代后原菌種(從省藥檢所買的那只)報廢;還有第一次傳代一般傳幾只,是不是多傳一些好?在做微生物限度時,是不是用生理鹽水(0.9%)稀釋成對照菌液,一般保存一個月?

疑問:我們廠在進行GMP認證,我想問一個有關微生物的問題:

從省藥檢所剛買了一只斜面大腸桿菌(Escherichia coli)菌種,如果一個月傳代一次,那么一般傳多少代后原菌種(從省藥檢所買的那只)報廢;還有第一次傳代一般傳幾只,是不是多傳一些好?在做微生物限度時,是不是用生理鹽水(0.9%)稀釋成對照菌液,一般保存一個月? 
 

回復1:你可以把那一代次的擴大培養(yǎng)一些,然后凍存,就有效的解決傳代次數(shù)太多報廢問題。一般第一次傳代,需要傳3代,并不需要傳的越多越好?;旧蟼?代以后細菌以及基本適應了環(huán)境,對實驗影響就會小了。出代次數(shù)過多,導致耐藥行以及毒力的改變,也不是好事。

回復2:可以分批凍存,用時拿一點出來,這樣可以避免傳代過多!

回復3:有些菌株如XLI-Blue、JM系統(tǒng)的可以在傳代的過程添加四環(huán)素進行篩選,從而淘汰突變型個體。

回復4:傳代次數(shù)過多,導致耐藥行以及毒力的改變。如果你想長期保留此菌種,你可以按照下面的方法保存(可保存很長時間):細菌培養(yǎng)液0.5ml + 30%甘油0.5ml,于-20或-80攝氏度長期保存。

 

PhD高壓均質機:最高操作高壓力為30000psi/207Mpa, 可廣泛用于酵母菌破碎、細菌破碎、放線菌破碎、真菌破碎、動物細胞破碎、轉基因細胞破碎、雜交瘤破碎、植物種子破碎、動植物病毒破碎、噬菌體破碎、大腸桿菌破碎、結核桿菌破壁、絲狀真菌破碎、Vero細胞破碎、植物細胞破碎、藻類破碎提取、胞內蛋白及核酸、質粒和基因文庫等等生物學、生命科學領域。

另外,PhD高壓均質機,還可廣泛應用于多種納米材料、固液混懸劑、納米化合物、動物/植物組織提取物、脂質體、脂肪乳、脂微球、納米乳劑、納米粒、SLN、微乳等納米均質領域,均質后樣品粒度可≤100nm,且分布均勻,樣品穩(wěn)定性強。

即該高壓均質機,除用于生物學、生命科學領域,還可用于藥學、農學、環(huán)境材料學、化工等領域,方便實現(xiàn)多個學科共享。

PhD中國辦事處,專業(yè)承擔高壓均質機、過濾擠出器的各項服務工作:安裝調試、培訓、售后服務、技術支持等。人員配備方面,有固定的專業(yè)工程師,用心服務于高壓均質機、過濾擠出器的用戶,使用戶無后顧之憂。

  
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